淋球菌的分离培养方法怎样操作

淋球菌的分离培养方法怎样操作

由男性病人尿道取材时，一般用接种环或小 棉拭子伸入尿道2~4mm,转动后取出分祕物， 有时略带少许黏膜，故患者感觉疼痛，但较轻 微，为一过性疼痛；从女病人取材时，需先用阴 道窥器暴露宫颈口，用棉拭子揩去宫颈口的脓性 分泌物后，再用第二个棉拭子插入宫颈管1cm，转动并停留10~20秒钟，让棉拭子充分吸附分 泌物，患者也有轻微的不适感。将采集的标本立即接种于培养基中。国外常 用的培养基有Thayer - Martin培养基、New York City培养基和Martin - Lewis培养基。国 内研制国产化的培养基，具体培养方法为使用 5%~10%二氧化碳环境（烛缸），培养温度为 36℃，相对湿度80%以上，培养24~48小时观 看结果。

霉菌性阴道炎该怎样确诊呢

1、细胞学检查。

在皮损基底部取标本，用巴氏或瑞特-吉姆萨染色法染色后，于光镜下观察，于感染细胞中出现胞浆空泡，细胞融合成多核巨细胞，有时见细胞核内包涵体。这种检查的敏感性只有抗原检测法、DNA检测法或病毒分离培养法的敏感性的50%～70%，而且不具特异性。

2、电子显微镜检查。

可显示水疱或其它皮损中的病毒颗粒，但敏感性低，不到病毒分离培养法的10%，而且不能与其它霉菌性阴道炎病毒相区别。

3、抗原检测。

用免疫学技术检测病毒抗原是目前最常用的快速诊断方法。这些方法均以特异性抗病毒抗体为基础，这些方法的敏感性可达病毒分离培养法的70%～90%。但其前提是要选择质量高、特异性好的试剂。

淋球菌感染治疗注意事项

(1)淋球菌耐药：根据近年来我国淋球菌耐药监测的资料，我国淋球菌分离株对青霉素及四环素的染色体耐药较为普遍，许多城市和地区检出(PPNG)。质粒介导的TRNG亦呈上升趋势。青霉素和四环素目前已不作为治疗淋病的推荐药物。此外，耐喹诺酮淋球菌已在我国出现，且耐药菌株比率逐年增高，许多地区耐喹诺酮淋球菌的比率高达80%以上，在这些地区不应选用该类药治疗淋病。对喹诺酮耐药性不清楚的地区，在给患者应用环丙沙星或氧氟沙星时，需密切随防，观察疗效或及时调整治疗方案，防止治疗失败。

(2)混合感染：泌尿生殖道淋球菌感染常同时合并沙眼衣原体感染(在男性约占20%，女性约占40%)。因此，推荐对成人淋病患者常规进行衣原体筛查或同时加用治疗衣原体的药物。如可选用多西环素100mg/次，2次/d，口服，连用10天，或阿奇霉素1g，顿服。

(3)性伴治疗：淋病为可治愈的性病，但人体对淋球菌感染无有效的特异性免疫，易重复感染是其特点之一。性伴未进行治疗往往是导致淋病复发或再感染的重要原因。因此，对确诊为淋球菌感染的全部患者应进行性伴追踪。对有症状尿道感染男性患者近2周内接触的性伴均应进行检查和治疗，对其他部位感染或无症状患者应追踪近3个月内的性伴。

(4)有合并症淋病的治疗：无合并症肛门生殖器淋球菌感染若治疗不及时或治疗不当，感染可进一步蔓延导致局部或系统性并发症。男性最常见的合并症为附睾炎，女性最常见的合并症为盆腔炎症性疾病(PID)及前庭大腺炎。对有合并症淋病的治疗除疗程要足够(10天)外，还应考虑到多种病原体的混合感染，如合并衣原体或(和)厌氧菌感染，治疗方案应包括针对这些病原体的抗生素。

(5)随访：对接受正规治疗，没有再接触新性伴或未治疗的性伴，临床症状和体征全部消失而达到临床痊愈的患者，不必常规做病原学检查进行判愈。有下列情况时应做淋球菌培养检查：以前有治疗失败史;对抗生素耐药;未遵医嘱治疗;咽部或直肠淋球菌感染;接触未经治疗的性伴;怀疑非培养试验结果为假阳性;妊娠期感染;并发盆腔炎症性疾病或播散性淋球菌感染;儿童患者。病原学检查宜在停药1周后进行。

淋球菌感染怎么治疗好的快

1、淋球菌耐药：根据近年来我国淋球菌耐药监测的资料，我国淋球菌分离株对青霉素及四环素的染色体耐药较为普遍，许多城市和地区检出(PPNG)。质粒介导的TRNG亦呈上升趋势。青霉素和四环素目前已不作为治疗淋病的推荐药物。此外，耐喹诺酮淋球菌已在我国出现，且耐药菌株比率逐年增高，许多地区耐喹诺酮淋球菌的比率高达80%以上，在这些地区不应选用该类药治疗淋病。对喹诺酮耐药性不清楚的地区，在给患者应用环丙沙星或氧氟沙星时，需密切随防，观察疗效或及时调整治疗方案，防止治疗失败。

2、混合感染：泌尿生殖道淋球菌感染常同时合并沙眼衣原体感染(在男性约占20%，女性约占40%)。因此，推荐对成人淋病患者常规进行衣原体筛查或同时加用治疗衣原体的药物。如可选用多西环素100mg/次，2次/d，口服，连用10天，或阿奇霉素1g，顿服。

3、性伴治疗：淋病为可治愈的性病，但人体对淋球菌感染无有效的特异性免疫，易重复感染是其特点之一。性伴未进行治疗往往是导致淋病复发或再感染的重要原因。因此，对确诊为淋球菌感染的全部患者应进行性伴追踪。对有症状尿道感染男性患者近2周内接触的性伴均应进行检查和治疗，对其他部位感染或无症状患者应追踪近3个月内的性伴。

4、有合并症淋病的治疗：无合并症肛门生殖器淋球菌感染若治疗不及时或治疗不当，感染可进一步蔓延导致局部或系统性并发症。男性最常见的合并症为附睾炎，女性最常见的合并症为盆腔炎症性疾病(PID)及前庭大腺炎。对有合并症淋病的治疗除疗程要足够(10天)外，还应考虑到多种病原体的混合感染，如合并衣原体或(和)厌氧菌感染，治疗方案应包括针对这些病原体的抗生素。

5、随访：对接受正规治疗，没有再接触新性伴或未治疗的性伴，临床症状和体征全部消失而达到临床痊愈的患者，不必常规做病原学检查进行判愈。有下列情况时应做淋球菌培养检查：以前有治疗失败史;对抗生素耐药;未遵医嘱治疗;咽部或直肠淋球菌感染;接触未经治疗的性伴;怀疑非培养试验结果为假阳性;妊娠期感染;并发盆腔炎症性疾病或播散性淋球菌感染;儿童患者。病原学检查宜在停药1周后进行。

皮肤真菌感染需要做哪些化验检查

1.直接涂片镜检方法

直接涂片镜检是一种常用、简便而迅速的真菌检测方法,对真菌感染的诊断具有重要意义。直接镜检阳性,说明有真菌感染,还可提示真菌的致病活动性,对少数真菌可确定它们的种属,如新型隐球菌、念珠菌属等。但大多数真菌的种属不能通过直接镜检来确定,还需要进一步培养鉴定。另外,直接镜检阴性也不能排除真菌感染的可能性。

2 分离培养方法

培养的目的在于从临床标本中分离真菌,以确定是否有真菌感染,特别是在直接镜检为阴性时。

真菌生长缓慢,培养常需要数天甚至数周才有结果,而且培养的阳性率较低。此外,培养方法是通过表型特征来鉴定真菌,而表型特征容易受到外界因素如温度变化或药物治疗的影响

3 真菌的组织病理学检查方法

真菌的组织病理学检查对真菌病的诊断具有十分重要的意义。

4 免疫学方法

可以用真菌抗原做皮肤过敏试验,以检测有无该真菌感染。常用的血清学检验方法为补体结合试验、凝集试验和沉淀试验等。

5 分子生物学方法

基因分型技术己被证明是皮肤癣菌分类的有效方法,基因型的特征比表型特征更稳定、更精确。

包皮龟头炎做什么检查

1、检查化验：对于有念球菌感染龟头所诱发的念珠菌性包皮龟头炎，在病变的龟头或是包皮上取材料借助显微镜观察或是加以培养的话，可发现存在有大量的念球菌。若是滴虫感染的包皮龟头炎，在龟头部位的分泌物中可发现滴虫。

2、直接镜检：借助仪器刮取患病的阴茎龟头、冠状沟有皮损处的鳞屑作为待检标本。借助10%氢氧化钾或生理盐水将其做成制片后，在显微镜下观察可看到有成群的卵圆形孢子或是假菌丝，若是存在有假菌丝，则表示念球菌还处于致病阶段。

3、分离培养：进行涂片检测后，发现是阴性的患者，可以继续进行念球菌培养。在无菌环境下，将需要检查的标本接种在沙氏培养基上，每管接种2-3处，之后放入到37℃温箱内储备24-48小时之后再加以观察，用接种针挑取少量的菌落涂片，在镜下观察，可发现有大量的芽孢子，就可初步判定为念球菌感染了。

淋球菌感染的检查

包括涂片检查，培养检查，药敏试验及产青霉素酶淋球菌(PPNG)测定，抗原检测，基因诊断。

1.涂片检查 取患者尿道分泌物或宫颈分泌物，作革兰染色，在多形核白细胞内找到革兰阴性双球菌，女性宫颈分泌物中杂菌多，敏感性和特异性较差，阳性率仅为50%～60%，且有假阳性，因此世界卫生组织推荐用培养法检查女性患者，慢性淋病由于分泌物中淋球菌较少，阳性率低，因此要取前列腺按摩液，以提高检出率，咽部涂片发现革兰阴性双球菌不能诊断淋病，因为其他奈瑟球菌属在咽部是正常的菌群，另外对症状不典型的涂片阳性应作进一步检查。

2.培养检查 淋球菌培养是诊断的重要佐证，培养法对症状很轻或无症状的男性，女性患者都是较敏感的方法，只要培养阳性就可确诊，在基因诊断问世以前，培养是世界卫生组织推荐的筛选淋病的惟一方法，目前国外推荐选择培养基有改良的Thayer-Martin(TM)培养基和New York City(NYC)培养基，国内采用巧克力琼脂或血琼脂培养基，均含有抗生素，可选择地抑制许多其他细菌生长，在36℃，70%湿度，含5%～10%二氧化碳(烛缸)环境中培养，24～48h观察结果，培养后还需进行菌落形态，革兰染色，氧化酶试验和糖发酵试验等鉴定，培养阳性率男性80%～95%，女性80%～90%。

3.抗原检测

(1)固相酶免疫试验(EIA)：可用来检测临床标本中的淋球菌抗原。

(2)直接免疫荧光试验：通过荧光标记的单克隆抗体直接检测淋球菌外膜蛋白-1。

4.基因诊断

(1)基因探针诊断：淋球菌的基因探针诊断，所用的探针有：质粒DNA探针，染色体基因探针和rRNA基因探针，基因探针诊断的敏感性较差。

(2)基因扩增检测：PCR技术的出现进一步提高了淋球菌检测的灵敏性，它具有快速，灵敏，特异，简便的优点，可以直接检测临床标本中极微量的病原体，操作时要防止污染，以免出现假阳性。

5.药敏试验 在培养阳性后进一步作药敏试验，用纸片扩散法做敏感试验，或用琼脂平皿稀释法测定最小抑菌浓度(MIC)，用以指导选用抗生素。

6.PPNG检测 β内酰胺酶，用纸片酸度定量法，使用Whatman I号滤纸PPNG菌株能使其颜色由蓝变黄，阳性为P-PPNG，阴性为N-PPNG。

轻度心肌炎者，心电图可见传导阻滞。

胃疼患者的常规检查方法有哪些

1、常用化验检查包括有：查血，尿，粪三大常规，还有大便隐血试验，寄生虫，微生物检查，尿胆红素，尿胆原检查，血清胆红素，自身抗原或(和)抗体，癌胚抗原，胃泌素，胰泌素等测定。

2、形态学检查有：X线钡餐检查，X线计算机体层扫描(CT)和磁共振成像检查。

3、幽门螺杆菌检测：如果培养阳性即可确诊。据研究认为该菌与以下疾病有关：阳性见于消化性溃疡：胃及十二指肠黏膜分离培养阳性率分别为57%～85%及86%～96%;慢性胃炎：胃黏膜分离培养阳性率85%;十二指肠炎：分离培养阳性率高，如果在活动期可高达100%。

淋球菌感染的检查项目有哪些

包括涂片检查，培养检查，药敏试验及产青霉素酶淋球菌(PPNG)测定，抗原检测，基因诊断。

1.涂片检查 取患者尿道分泌物或宫颈分泌物，作革兰染色，在多形核白细胞内找到革兰阴性双球菌。女性宫颈分泌物中杂菌多，敏感性和特异性较差，阳性率仅为50%～60%，且有假阳性，因此世界卫生组织推荐用培养法检查女性患者。慢性淋病由于分泌物中淋球菌较少，阳性率低，因此要取前列腺按摩液，以提高检出率。咽部涂片发现革兰阴性双球菌不能诊断淋病，因为其他奈瑟球菌属在咽部是正常的菌群。另外对症状不典型的涂片阳性应作进一步检查。

2.培养检查 淋球菌培养是诊断的重要佐证，培养法对症状很轻或无症状的男性、女性患者都是较敏感的方法，只要培养阳性就可确诊。在基因诊断问世以前，培养是世界卫生组织推荐的筛选淋病的惟一方法。目前国外推荐选择培养基有改良的Thayer-Martin(TM)培养基和New York City(NYC)培养基。国内采用巧克力琼脂或血琼脂培养基，均含有抗生素，可选择地抑制许多其他细菌生长。在36℃，70%湿度，含5%～10%二氧化碳(烛缸)环境中培养，24～48h观察结果。培养后还需进行菌落形态，革兰染色，氧化酶试验和糖发酵试验等鉴定。培养阳性率男性80%～95%，女性80%～90%。

3.抗原检测

(1)固相酶免疫试验(EIA)：可用来检测临床标本中的淋球菌抗原。

(2)直接免疫荧光试验：通过荧光标记的单克隆抗体直接检测淋球菌外膜蛋白-1。

4.基因诊断

(1)基因探针诊断：淋球菌的基因探针诊断，所用的探针有：质粒DNA探针、染色体基因探针和rRNA基因探针。基因探针诊断的敏感性较差。

(2)基因扩增检测：PCR技术的出现进一步提高了淋球菌检测的灵敏性，它具有快速、灵敏、特异、简便的优点，可以直接检测临床标本中极微量的病原体。操作时要防止污染，以免出现假阳性。

5.药敏试验 在培养阳性后进一步作药敏试验。用纸片扩散法做敏感试验，或用琼脂平皿稀释法测定最小抑菌浓度(MIC)，用以指导选用抗生素。

6.PPNG检测 β内酰胺酶，用纸片酸度定量法，使用Whatman I号滤纸PPNG菌株能使其颜色由蓝变黄，阳性为P-PPNG，阴性为N-PPNG。

淋球菌的分离培养是怎么回事

对于某些治疗不正规的患者，以及女性患 者，分泌物涂片诊断就不够了，也很难用于判断 治疗结果，这时一定要进行淋球菌的分离培养。 这种方法特异性高，但方法较为复杂，对实验室 的要求也较高，所以要到正规医院去作诊断，很 难想象在环境污浊、杂物横放的无照行医者那里 能作出正确的培养结果来。

淋病是如何引起的

传染途径：

1、通过性接触传染

成人特别是男性淋病99%-100%属于性交传染。传播速度快，而且感染率很高，感染后3-5天即可发病。感染人群中以青壮年为主。

目前，我国以暗娼为主要传染源。调查资料表明，在淋病患者中男女一次性交感染率为22%-35%;男女双方感染率是男性易于传染给女性。

2、非性接触传染

此种情况较少，主要是接触病人含淋病双球菌的分泌物或被污染的用具，如沾有分泌物的毛巾、脚布脚盆、衣被，甚至于厕所的马桶圈等均可传染。特别是女性(包括幼女)，因其尿道和生殖道短，很易感染。

病原体：

1.发现 1879年，奈瑟从35例急性尿道炎、阴道炎及新生儿急性结膜炎病人的分泌物中，分离出淋病双球菌。1885年，Bumm在人、牛或羊的凝固血清培养基上培养淋球菌获得成功，将菌种接种于健康人的尿道内也可产生同样的症状。至此，淋球菌是淋病的病原体的结论始告成立。

2.形态与染色 淋球菌呈卵圆形或豆形，菌体长0.6～0.8µm，宽约0.5µm。常成对排列，邻近面扁平或稍凹陷，像两粒豆子对在一起。无鞭毛，不形成芽孢。在急性感染的机体内，其形态较典型，多位于细胞浆内。慢性期则在细胞外。淋球菌革兰染色阴性。用碱性美蓝染色时，菌体呈蓝色。用Pappehheim Saathof染色时，菌体呈红色，背景为天蓝色，十分清晰。

淋球菌在人工培养基上有五种不同的菌落形态，分别称为T1，T2，T3，T4，T5，其中T1和T2有毒力，T3和T4无菌毛，不能感染人类。

3.菌体结构 淋球菌的致病主要与菌体外面的结构有密切关系。淋球菌外面结构为外膜，外膜的主要成分为膜蛋白、脂多糖和菌毛。膜蛋白可使淋球菌黏附于人体黏膜上，通过细胞吞噬作用进人细胞，在细胞内大量繁殖，导致细胞崩解，淋球菌扩散到黏膜下层引起感染。菌毛易黏附于子宫腔和口腔上皮细胞表面，有致病力及传染性。

4.培养与生化特性 在含有动物蛋白质如血液、血清、蛋黄、腹水等的培养基上生长良好。培养的适宜温度为35～36℃，适宜pH为7.5，需要在5%二氧化碳的环境中培养。

在人体尿道中可使葡萄糖发酵，但不能使果糖发酵，因此，可利用这一特性作葡萄糖发酵试验，以与脑膜炎双球菌鉴别。淋球菌不产生靛基质及硫化氢，在生长过程中可产生氧化酶，这在早期鉴定有一定意义。

5.营养分型 根据淋球菌培养时所需要的氨基酸和核酸营养基础，可将淋球菌分为35个营养型，其中Arg、Hyx、Ura型淋球菌可引起无症状淋病及播散性淋病，对血清具有抗力，但对青霉素及其他一些药物则敏感。

6.抵抗力 淋球菌较为娇嫩，最怕干燥，适宜在潮湿、温度为35～36℃、含2.5%～5.0%二氧化碳的条件下生长，其生长的最适pH为7.0～7.5。淋球菌对外界理化因素的抵抗力相当差，在完全干燥的环境中1～2h即死亡，但若附着于衣裤和被褥中，则能生存18～24h，在厚层脓液或湿润的物体上可存活数天。在50℃仅能存活5min。淋球菌对常用的黏膜杀菌剂抵抗力很弱。它对可溶性银盐尤其敏感，1∶4000硝酸银溶液可使其在7min内死亡，使脓液中的淋球菌2min内死亡。1%苯酚(石炭酸)溶液能在3min内将其杀灭。除耐药菌株外，淋球菌对抗生素敏感，但抗生素的最小抑菌浓度逐渐有所提高。

包皮龟头炎应做哪些检查项目

1.检查化验：

对于由于念珠菌感染诱发的龟头炎，在病变的龟头、包皮上取材进行镜检或是进行培养后，能够找到念球菌。而对于滴虫性包皮龟头炎，能够在分泌物内部找到滴虫，滴虫量的多少与患者病症程度具有密切关系。

2.直接镜检：

对病变部位的龟头或是冠状沟，包皮外损部位的鳞屑进行检查，在显微镜下可观察到存在有成群的卵园形孢子和假菌丝。若是能够观察到较多的假菌丝，表明念球菌处于一种致病状态，此时需要尽快的对症治疗，将病情更好的控制。

3.分离培养：

对于接受涂片检查阴性的患者，可再进行念球菌的培养。在无菌环境中，将需要检查的标本接种于沙氏培养基上，将其放入37℃温箱内孵育24-48小时后观察，会发现存在有许多乳白色菌落生长。取少量的菌落涂片，镜检可发现有大量的芽孢子。

淋球菌的意义

泌尿科病人的性传播疾病的诊断。在临床拟诊为性传播疾病的过程中，淋病约占一半。淋球菌快速而准确的实验方法，对诊断淋病和控制淋病的传播至关重要。

1.尿道脓性分泌物的涂片检查

取尿道分泌物制成涂片后作革兰染色，检查有无典型细胞内革兰阴性双球菌，可作初步诊断的依据。

2.分离培养

如果标本中有淋球菌，则在合适的培养基上经培养后可长成菌落。培养法对男性及女性标本都是适用的，是世界卫生组织推荐的筛查淋病病人的唯一方法，也是诊断淋病的金标准方法。

3.革兰染色

典型革兰阴性双球菌表明可能为淋球菌，但必须进一步做试验鉴定。

4.氧化酶试验

淋球菌在生长过程中产生氧化酶。往培养基上生长了24～48小时的菌落上加氧化酶纸片，淋球菌菌落的颜色可变成紫红乃至黑色。标本涂片菌体形态符合淋菌特征，培养长出淋菌菌落，加上氧化酶试验阳性，即可作出初步诊断。

5.糖发酵试验

糖发酵试验是淋球菌的的确证鉴定试验。确证和区别其他奈瑟菌。

淋病如何确诊

诊断淋病有哪些检查呢?涂片检查：在男性患者尿道取材特异性较高，具有初步诊断价值：但在女性病人中，由于道中的菌从复杂，涂片中可以见到与淋菌相似而又是的双球菌，易致误诊。因此，世界卫生组织不推荐在诊断性淋病时应用涂片而主张直接用培养的方法。②淋菌培养：淋菌分离培养时取材方法一定要下确。由于淋球菌主要在柱状上皮不是在复层鳞状上皮细胞中增殖，所以从尿道或宫颈取材时深度一定要够。

从宫颈部位取材时，用第一个棉试揩去宫口的脓性分汤物，再用第二个棉试轻轻捅入宫颈管lcm以上，转动并放置10到30秒，让棉试充分吸附分泌物，取材料中最好带有少量脱落的粘膜细胞。如果只在阴道口取少量分泌物作培养，分离的阳性率很低，因活菌随分泌物从了宫颈口流，通过阴道时受各种杂菌的作用，加PH 值低，到阴道时细菌的生命力已很低，甚至死亡。同时要注意淋菌对各种理化I夭l了的抵抗力很弱，取材过程中所用的器材不能粘有消毒药液。淋菌培养足日前唯一用于淋病筛查和发现病人的方法。

在做实验检查前腰询问性病接触史及发病经过，以免漏诊。然后观察淋病感染的早期体征主要局限于下生殖道、泌尿道。妇科检金时注意尿道、尿道旁腺、道庭火腺有无炎症表现，宫颈口有无脓性排液。

诊断灰指甲要做哪些检查

一、真菌的分离与鉴定

真菌的分离与鉴定是对真菌进行分离培养然后根据菌落的特征和镜下形态，结构以确定菌种。必要时通过生化反应、鉴别试验、动物接种等方法，以明确菌种。严格无菌操作，避免污染，在培养期间，如发现污染菌生长，应立即转种。接种后的第二天开始逐日观察，并记录生长情况。培养阳性可确立诊断。阴性者需培养3周方可发报告。检查过程如下：

1.分离培养

(1)试管法：用无菌操作的方法，将采集的标本接种于葡萄糖蛋白琼脂(SDA)培养基斜面上，每个斜面接种3～4处，轻轻划破，置22～25℃温箱连续培养1～3周，做好观察记录。

(2)小培养：先备好无菌玻璃平皿内有弯曲玻棒和载玻片，用无菌小刀将SDA培养基切成1cm2方块，放入无菌平皿内的载玻片中央，接种菌种后，取一片无菌盖玻片放在接种好的方块琼脂基上，平皿内放上无菌潮湿棉球，放入22～25℃温箱，待有生长后，取出盖玻片，并反覆在玻片上，乳酸棉蓝染色镜下观察。

2.菌种鉴定

根据菌种的形态、大小、结构、边缘、颜色、生长速度、表面性质、下沉现象及镜下的形态，确定菌种必要时，用鉴别培养基、生化试验等方法进行鉴定。

二、真菌培养检查

真菌培养检查是对真菌进行培养并对真菌的菌属进行鉴定，进而对真菌感染引起的疾病进行针对性的治疗的方法。检查前禁忌要注意个人卫生，避免吃对皮肤有强烈刺激性的食物。检查过程如下：

1.采集标本：体表真菌的标本有毛发、皮屑、甲屑、痂等，标本在分离前常先用75%的乙醇消毒。深部真菌的标本可根据情况取痰、尿液、粪便、脓液、口腔或阴道分泌物、血液、脑脊液、各种穿刺液和活检组织，采集标本应注意无菌操作。

2.培养检查：可提高真菌检出率，并能确定菌种。标本接种于葡萄糖蛋白胨琼脂培养基上，置室温或37℃培养1～3周。必要时可行小培养协助鉴定。菌种鉴定常根据菌落的形态及显微镜下形态判断。对某些真菌，有时尚需配合其他鉴别培养基、生化反应、分子生物学方法确定。