白喉杆菌的培养特性

白喉杆菌的培养特性

白喉杆菌为需氧菌或兼性厌氧菌，最适温度为37℃，最适PH为7.2~7.8,在白喉棒杆菌含血液、血清或鸡蛋的培养基上生长良好。菌落呈灰白色、光滑、圆形凸起，在含有0.033%亚碲酸钾血清培养基上生长繁殖能吸收碲盐，并还原为金属碲，使菌落呈黑色，为本属其他棒状杆菌共同特点。且亚碲酸钾能抑制标本中其他细菌的生长，故亚碲酸钾血琼脂平板可作为棒状选择培养基。根据在此培养基上白喉杆菌落的特点及生化反应，可将白喉杆菌区分为重型(Gravis)、中间型(Intermedus)和轻型(Mitis)三型，三型白喉杆菌的分布有所不同，常随地区和年份有别，有流行病学意义。

白喉是由什么原因引起的

(一)发病原因

白喉棒状杆菌(corynebacterium diphtheria)，简称白喉杆菌，革兰染色阳性菌，长约2～3μm，宽0.5～1μm。在涂片上，常呈V，X，Y字排列，一端或两端膨大，菌体内有浓染颗粒，称异染颗粒。用Neisser染色时，菌体呈黄褐色，异染颗粒为蓝黑色;用Albert染色时，菌体呈绿色，异染颗粒为蓝黑色;用Ponder染色时，菌体呈淡蓝色，异染颗粒为深蓝色。白喉杆菌在亚碲酸钾培养基上生长良好，能使碲盐还原，菌落变黑，按其在培养基上的菌落形态及生化反应，白喉杆菌可分轻型、中间型及重型。以往认为轻型多产生咽白喉，中间型和重型多为流行株，引起的病情重。目前则认为3型菌可产生相同的毒素，患者病情的轻重与分型无明确的关系。近年来国内外均有轻型菌增多的报道。采用噬菌体裂解法、菌体DNA限制性内切酶法以及毒力试验等对分离到的白喉杆菌进行研究，有助于对本病进一步的了解。白喉杆菌侵袭力弱，仅在局部黏膜或皮肤生长繁殖。白喉杆菌产生的外毒素是致病的主要因素，外毒素是一种不耐热的多肽，有较强的毒性，人的致死量为130ng/kg体重，主要侵犯神经、心肌和肾上腺。白喉杆菌只有感染了携带产毒基因(Tox)的β噬菌体，才具有分泌外毒素的能力，并使人致病，若将无毒株与噬菌体处理后可变为有毒株，将有毒株置于含抗白喉杆菌噬菌体血清培养基中反复转种，可失去产毒能力变为无毒株。细菌的产毒能力由噬菌体基因控制，侵袭能力则由细菌基因控制。临床上用豚鼠或埃勒克(Elek)平板法进行毒力检测。近年来有些临床报道，从白喉患者的病变处分离出的白喉杆菌无毒力，无毒力菌株如何引起临床症状，尚不清楚，须进一步研究。白喉外毒素有两个特点，一是具有高度的抗原性，可刺激人体产生高效价的抗毒素;二是很不稳定，经贮存、日光照射、化学药品处理或加热到75℃，均可减少或完全丧失其毒性。因此，若以0.3%～0.5%的甲醛溶液处理，经过1个月，可使其毒性丧失，而抗原性仍保存，成为类毒素，可作为预防注射及制备抗毒血清之用。白喉杆菌对外界环境的抵抗力较强，耐冷冻、干燥，在玩具、衣物上可存在数天，造成间接传播，对湿热和化学消毒剂敏感，0.1%升汞及5%苯酚溶液1min即可杀灭该菌，加热58℃ 10min即可死亡。

(二)发病机制

白喉杆菌侵袭力弱，侵入上呼吸道黏膜后，仅在表层上皮细胞内繁殖，一般不引起菌血症。当局部黏膜有损伤时，如患麻疹、猩红热、百日咳或上呼吸道感染时，白喉杆菌的侵袭力增强。在白喉杆菌的繁殖过程中产生的外毒素不但可引起局部病变，还可引起全身性中毒性病变，是致病的主要因素。此毒素有A和B两个亚单位组成，两者通过二硫键连接，B亚单位无直接的毒性，但它有一个受体结合区和一个转位区。B亚单位可以与细胞表面特异性受体(膜受体pro-hHB-EGF)结合，结合后通过转位区的介导，可输送A亚单位进入宿主胞质内(图1)。

白喉棒状杆菌的培养特性

白喉杆菌为需氧菌或兼性厌氧菌，最适温度为37℃，最适PH为7.2～7.8,在含血液血清或鸡蛋的培养基上生长良好。菌落呈灰白色、光滑、圆形凸起，在含有0.033%亚碲酸钾血清培养基上生长繁殖能吸收碲盐，并还原为金属碲，使菌落呈黑色，为本属其他棒状杆菌共同特点。且亚碲酸钾能抑制标本中其他细菌的生长，故亚碲酸钾血琼脂平板可作为棒状选择培养基。根据在此培养基上白喉杆菌落的特点及生化反应，可将白喉杆菌区分为重型(Gravis)、中间型(Intermedus)和轻型(Mitis)三型，三型白喉杆菌的分布有所不同，常随地区和年份有别，有流行病学意义。

白喉杆菌的特异防治

预防接种效果良好，可显著降低发病率和病死率。6个月以上至3岁儿童应预防接种白喉类毒素、百白破三联疫苗制剂或明矾淀白喉类毒素。8岁以上锡克氏试验阳性者也需接种。对密切接触过白喉病人的易感儿童，可肌内注射1000~2000单位白喉抗毒素作紧急预防，同时注射白喉类毒素以便延长免疫力。

白喉抗毒素做为特效治疗制剂，应在发病早期注射足量的白喉抗毒素，一般用量为2万~10万单位，作肌肉注射，重者可作静脉滴注。使用抗毒素血清之前进行皮肤试验，防止发生异种血清过敏反应。使用抗毒素的同时，应给予抗菌治疗，如用普鲁卡因青霉素肌注，直至症状消失和白喉杆菌培养阴性为止。

白喉的预防

1.控制传染源 隔离，治疗患者至症状消失后2次鼻咽部培养阴性，如无培养条件，在充分治疗的情况下，可在病期2周时解除隔离，对密切接触者应做鼻咽部培养并观察7天，对未接受全程免疫的幼儿，最好给精制白喉类毒素和抗毒素同时注射，流行期间托幼机构及小学应认真进行晨间检查，积极治疗带菌者，青霉素用普通剂量治疗5～7 天，集体儿童和成人机构内的接触者应留察7天，并作鼻咽拭子培养和白喉杆菌毒素试验，成年人密切接触者也应作这些检查：

①培养和毒素试验均阳性者作为白喉病例处理，应隔离观察，并用青霉素治疗，一旦出现症状即用抗毒素。

②培养阳性，毒素试验均阳性者作为白喉病例处理。

③培养和毒素试验均阴性者可解除留察。

④培养阴性，毒素试验阳性者，应即给予预防接种。

2.提高机体免疫力 自动免疫：可用白，百，破混合菌苗或吸附精制白喉类毒素注射，被动免疫：白喉易感者因体弱或患病不能接受白喉类毒素注射而又接触了白喉患者，可给抗毒素，成人1000～20000U肌内注射，小儿1000U，有效期仅2～3周，人体对白喉的免疫力，决定于血中抗毒素水平，血清中含有10U/L即有保护作用，可采用白喉杆菌毒素(锡克)试验，或间接血凝试验及ELISA法检测人群血清中抗毒素水平，了解人群抗毒素水平，有助于预测白喉流行之可能及程度，亦可测知预防注射的效果，人群免疫水平的高低与发病率呈负相关，我国一些地区抗毒素水平已达85%～95%，这些地区近期不会有白喉流行。

内毒素和外毒素的区别

外毒素和内毒素是细茵产生的两大类毒素物质。外毒素是病原菌在代谢过程中分泌到菌体外的物质。产生外毒素的细菌主要是一些革兰氏阳性细菌，例如金黄色葡萄球菌、白喉杆菌、破伤风杆菌等。少数革兰氏阴性菌如霍乱弧菌和产毒性大肠杆菌等也能产生外毒素。我们把产生外毒素的细菌接种到液体培养基中培养，经过滤除培养液中的细菌，即可得到外毒素。

外毒素的化学成分是蛋白质。毒性极不稳定，对热和某些化学物质敏感，容易受到破坏。用3%～4%的甲醛溶液处理，其毒性完全消失。外毒素的抗原性较强，能刺激机体产生抗毒素。

外毒性很强，例如纯化的肉毒杆菌外毒素，1毫克可以杀死2000万只小鼠，对人的最小致死量为0.1微克，其毒性比氰化钾强1万倍。

细菌产生的外毒素对组织的毒性作用有高度的选择性，各自引起特殊的临床症状。如白喉杆菌产生的白喉外毒素，能抑制人体细胞蛋白质的合成，使细胞变性死亡，导致心肌炎、肾上腺出血和神经麻痹;破伤风杆菌产生的是破伤风外毒素，作用到脊髓和脑，引起肌肉的痉挛和强直;霍乱杆菌产生的肠毒素作用到小肠粘膜，使粘膜细胞分泌功能加强，引起严重的呕吐和腹泻。

白喉杆菌的所致疾病

白喉杆菌存在于患者或带菌者的鼻咽腔内，经飞沫或污染物品传播。

细菌感染机体后，在鼻、咽粘膜上繁殖并分泌外毒素。局部由于细菌和毒素的作用，渗出的纤维素和白细胞及坏死组织凝固在一起，形成灰白色膜状物，称为假膜。由于咽、喉、气管粘膜水肿及假膜脱落，可引起呼吸道阻塞，甚至造成窒息死亡。

细菌一般不入血，只是细菌产生的外毒素入血，并与易感组织细胞如心肌、肝、肾上腺或支配咽、腭肌等的外周神经结合，可引起细胞变性、坏死、内脏出血和神经麻痹。

临床上表现有心肌炎、软腭麻痹、声嘶、肾上腺功能障碍、血压下降等症状。

白喉如何预防

1.控制传染源 隔离，治疗患者至症状消失后2次鼻咽部培养阴性，如无培养条件，在充分治疗的情况下，可在病期2周时解除隔离，对密切接触者应做鼻咽部培养并观察7天，对未接受全程免疫的幼儿，最好给精制白喉类毒素和抗毒素同时注射，流行期间托幼机构及小学应认真进行晨间检查，积极治疗带菌者，青霉素用普通剂量治疗5～7 天，集体儿童和成人机构内的接触者应留察7天，并作鼻咽拭子培养和白喉杆菌毒素试验，成年人密切接触者也应作这些检查，

①培养和毒素试验均阳性者作为白喉病例处理，应隔离观察，并用青霉素治疗，一旦出现症状即用抗毒素，

②培养阳性，毒素试验均阳性者作为白喉病例处理，

③培养和毒素试验均阴性者可解除留察，

④培养阴性，毒素试验阳性者，应即给予预防接种。

2.切断传播途径 患者接触过的物品及分泌排泄物，可用加倍体积的20%含氯石灰乳剂浸泡1h，或用含氯消毒剂5000×10-6浸泡30min。

3.提高机体免疫力 自动免疫：可用白，百，破混合菌苗或吸附精制白喉类毒素注射，被动免疫：白喉易感者因体弱或患病不能接受白喉类毒素注射而又接触了白喉患者，可给抗毒素，成人1000～20000U肌内注射，小儿1000U，有效期仅2～3周，人体对白喉的免疫力，决定于血中抗毒素水平，血清中含有10U/L即有保护作用，可采用白喉杆菌毒素(锡克)试验，或间接血凝试验及ELISA法检测人群血清中抗毒素水平，了解人群抗毒素水平，有助于预测白喉流行之可能及程度，亦可测知预防注射的效果，人群免疫水平的高低与发病率呈负相关，我国一些地区抗毒素水平已达85%～95%，这些地区近期不会有白喉流行。

白喉病的检查

1.血象

白细胞计数轻度增多(10～20)×10/L，中性粒细胞百分比增高(0.80左右)。

2.咽、鼻黏膜拭子涂片。

3.奈瑟或庞氏染色镜检。

找到有异染颗粒的棒状杆菌(仅有参考价值)。

4.荧光抗体染色检查

阳性。

5.细菌培养

鼻咽拭子或患处取材培养生长白喉杆菌，毒力试验阳性。

白喉的危害

1、咽白喉 起病多较缓，有轻度或中度发热，中毒症状逐渐加重。局部炎症不严重，但于扁桃腺上有典型假膜，灰白色，开始薄，继变厚，边缘较整齐，基底与粘膜粘连牢固，不易剥落，用力刮除易引起出血。根据假膜范围大小及全身中毒症状的轻重，又可分为局限型(假膜不超出扁桃腺)、播散型(假膜超出扁桃腺)及中毒型(假膜广泛，全身中毒症状严重，常伴有颌下淋巴结肿大及淋巴结周围组织水肿，称“牛颈”)。

2、喉白喉 多数为咽白喉蔓延而来，也可原发于喉部，咽部无假膜。患儿表现发音嘶哑、犬吠样咳嗽，继而呼吸困难，吸气时喘鸣及肋间软组织、锁骨上窝及上腹部同时凹陷(三凹征)。根据临床表现，阻塞性呼吸困难可分4度。

第1度：患者安静时，无呼吸困难现象，但活动或哭闹时则有鼻翼煽动与三凹征。

第2度：患者有吸气时喘鸣及三凹征等呼吸困难现象，但安静时尚能入睡。

第3度：具有2度呼吸困难现象，并呈现烦躁不安，不能入眠。

第4度：具有3度呼吸困难现象，并有发绀或昏迷。

3、鼻白喉 全身症状轻微，仅有鼻塞，单侧或双侧前鼻孔有较多血性浆液性分泌物，鼻粘膜可覆有假膜，前鼻孔下面可有表浅皮肤糜烂。

4、混合型白喉 具有上述各型白喉中的1型以上者称混合型，如咽喉白喉、鼻咽白喉等。

5、异位白喉 白喉杆菌可侵入眼、耳、女孩外阴部、新生儿脐带及皮肤伤口等处，产生假膜，并常伴有继发感染。

6、白喉带菌者 无全身及局部征象，一般情况佳，白喉杆菌培养及毒力试验均为阳性，锡克试验阴性(患者对白喉毒素有免疫力)。

咽拭子采集的原理

正常人咽峡部培养应有口腔正常菌群，而无致病菌生长。咽部的细菌均来自外界，正常情况下不致病，但在机体全身或局部抵抗力下降和其他外部因素下可以出现感染等而导致疾病。因此，咽部拭子细菌培养能分离出致病菌，有助于白喉、化脓性扁桃体炎、急性咽喉炎等的诊断。

由于呼吸和食物都通过口腔，因此口腔中会有形形色色的细菌寄生。如卡它球菌、各种葡萄球菌、各种链球菌、类白喉杆菌、肺炎克雷伯菌及大肠杆菌等。另外还有厌氧菌，如消化球菌、拟杆菌及类酵母菌的存在。

流感是通过呼吸道传播的，咽部是此类病毒聚集较多的地方。咽拭子标本就是用医用的棉签，从人体的咽部蘸取少量分泌物，采取的样本就是咽拭子标本，为了检验呼吸道疾病病毒类型，往往通过咽拭子可以方便快捷准确地检测出该病毒类型。

百日咳到哪里查

如果怀疑是百日咳，可以去就近的公立医院进行相应的体格检查，抽血检查血常规、血沉，同时也进行痰液病原菌培养，从痰液中找到白喉杆菌、百日咳杆菌即可确诊。百日咳会导致患儿出现犬吠一样的咳嗽，或者鸡鸣样的咳嗽，需要及时采取大环内酯类的抗生素以及镇咳化痰类的药物对症治疗，缓解不舒服的症状。

花椒叶的功效和吃法 杀菌抗菌

花椒叶子中也含有挥发性的植物油，其中的柠檬烯成分具有很强效的杀菌抗菌作用，在民间常用花椒叶子煮水来清洗伤口，预防感染，花椒叶具有广谱抗菌的特性，对 花椒含挥发油、川椒素、植物甾醇、不饱和有机酸等，对白喉杆菌、炭疽杆菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎双球菌、伤寒杆菌、绿脓杆菌和某些皮肤真菌有抑制作用。