抗体检测注意事项

抗体检测注意事项

问题为了保证试验的特异性和敏感性，无论是颗粒性抗原、组织提取物、多肽抗原、重组抗原都必须纯化，否则容易产生非特异性反应。在应用标记免疫分析中，可引起本底数值的增高，极大地影响试验的准确性。在检测自身抗体时，许多抗原是用组织提取物，更应注意抗原的纯化问题。由于不同组织、器官间可存在相同抗原成分，使得同一自身免疫病，可检出几种不同自身抗体，同一自身抗体又可出现在不同自身免疫病中，这就影响了检验的特异性。因此提示我们，关于这方面特异性抗原的提取、纯化和合成，还有许多工作要做，是一项任重道远的任务。还必须指出，无论检测哪一种抗体，所用抗原的片段或成分的不同，都可影响其特异性及敏感性。因此采用一种新抗原时，需要进行严格对照，方可确定其应用价值。必须明确，不同的检测方法，灵敏度、准确性、重复性并不完全相同，加上试剂盒质量不一，都影响到试验结果。在应用或建立一个方法时，检测系统中所有成分的浓度必须经过严格滴定，选择最恰当的浓度范围。例如酶联免疫吸附试验(ELISA)，抗原及酶结合物浓度低，最后吸光度值太小，易出现假阴性，如浓度太高，吸光度值偏大，甚至移到标准曲线的平台，即处于不敏感的范围便会明显影响结果的可靠性。抗体有保护性抗体，非保护性抗体之分，有些抗体的水平达到高峰后旋即下降乃至消失，有些抗体可长期存在直至终身。如乙肝核心抗体(抗-HBc)，阳性率可高达70%左右，临床医生常因此产生困惑。其实这是抗-HBc的总抗体，可能长期存在。如其滴度低，即为既往感染过乙肝，有流行病学意义，高滴度才有临床诊断意义。再如自身抗体测定中，少数正常人也存在有少量自身抗体，它不仅对机体无害，而且能帮助机体清除衰老及变质的细胞对机体有利。另外，在临床诊断中，须针对不同发病机理检测相应抗体，如I型超敏反应应检测IgE，而在Ⅱ型超敏反应主要测IgG、IgM型抗体，又如鼻咽癌患者查的是EB病毒壳膜抗原-IgA(IgA/VCA抗体)。另外抗体测定和其他检验一样，存在着假阳性、假阴性的问题，可能由于方法学的不完善引起，或者由于机体反应性的不同所致，在解释结果时务必注意。

乙肝抗体检测目的

乙肝抗体检测的目的在于判断人体是否感染了乙肝病毒。

1、乙肝表面抗原阳性是感染乙肝病毒的指标，乙肝表面抗原本身具有抗原性，无传染性。

2、其他肝功能正常而仅仅乙肝表面抗原阳性者，称为乙肝病毒携带者。

3、乙肝表面抗原的滴度高低可判断患者的传染性，HBsAg的滴度越高，HBsAg及乙肝病毒DNA阳性的可能性越大，传染性也就越大。

4、大三阳：是指在乙肝两对半检测中，乙肝表面抗原(HBsAg)、E抗原(HBeAg)和核心抗体(HBcAb)检测均是阳性，提示乙肝病毒感染病毒复制活跃，有传染性，并不能提示病情是否严重。

5、小三阳：是指在乙肝两对半检测中，乙肝表面抗原(HBsAg)、E抗体(HBeAb)和核心抗体(HBcAb)检测均是阳性提示： (1)大多数情况下表示乙肝病毒复制减少，仍然有传染性。 (2)由大三阳转向小三阳并不意味着乙肝病毒复制完全停止。少数小三阳病人其血清HBV-DNA持续阳性，病毒复制活跃，病情较严重，病情进展迅速。

HIV抗体检测

目前作为诊断手段使用的检测主要包括抗HIV病毒抗体检测、病毒培养、核酸检测和抗原检测。

检测血液中的艾滋病病毒抗体是目前最常用的检测艾滋病病毒感染的实验室方法，一般要经过三个步骤：首先做初筛试验，如果为阳性，再做复检试验，复检试验阳性，第三步确认试验也为阳性才可诊断为艾滋病病毒感染。

对病毒抗体的检测，这不但是由于这类检测特异性、敏感性较高，方法相对简便、成熟，更重要的原因是HIV抗体在病毒感染后除早期短暂的”窗口期”外的整个生命期间长期稳定地存在并可被检测到。

在一些特殊情况下，当抗体检测无法满足HIV感染诊断的需要时，病毒分离及测定、核酸检测、抗原检测可作为辅助手段使用，这包括对非典型血清学反应样品的诊断、HIV感染的窗口期诊断、新生儿早期诊断和对特殊样品的诊断。

HIV抗体检测多少钱

目前而言，我国标准的艾滋病检测方法是血清学HIV抗体检测，这也是艾滋病诊断中最主要的指标和检测项目。

艾滋病检测费用并不高，多数城市只需要几十元，其中多数疑似艾滋病患者只需要初筛阴性，并不需要进一步检测。

其余少数需要进一步确认的患者则需要花费几百元。

此外HIV病毒载量测定价格就比较昂贵，艾滋病检测费用在千余元左右。这些检测要在国家批准的艾滋病检测实验室进行，这里人员素质、技术水平均达标，并有严格的保密制度，保护个人隐私。

HIV抗体检测多少钱

HIV抗体检测价格是与HIV检查方法相对应，根据检查方法不同，价格在100-180元之间。

HIV感染可以通过检测病毒的抗体，抗原，核酸或病毒培养来确定。目前，标准的检测方法是血清学HIV抗体检测，这种HIV检查费用不是很高。

对高度怀疑感染了HIV的孕妇，临床又急于尽快得到结果，可进行病毒载量测定。HIV病毒载量测定是对HIV核酸的定量测定，可测出每毫升血样中HIV核酸的拷贝数(一个HIV病毒颗粒含两拷贝)。检测方法可作为感染早期，抗体检测结果为不确定或抗体阴性者的辅助诊断，这种艾滋病检查费用较高。

HIV抗体检测是什么

HIV病毒是大家所熟知的艾滋病病毒，那么HIV抗体检测到底是怎么一回事儿呢?下面来给大家具体介绍一下。

检测血液中的HIV抗体是目前最常用的确诊艾滋病病毒感染的方法，也就是常说的血清学检测。艾滋病病毒进入体内后，人体的免疫系统会产生出相对应的艾滋病病毒抗体。检测首先要经过初筛检测，若结果为阳性，需再做确证检测，确证检测为阳性则可以认定艾滋病病毒感染。正常孕妇HIV抗体为阴性。

甲肝抗体检测

抗-HAVIgM：甲型肝炎特异性抗体-(抗-HAVIgM)出现早，一般在发病数日即可检出，黄疸期达到高峰，1～2月抗体滴度下降，3～4月大部分消失。是甲型肝炎早期诊断的重要指标。常用方法有酶联免疫吸附试验(ELISA)和固相放射免疫试验(SPRIA)，其灵敏度高，特异性强。为急性肝炎患者检测的常规项目。类风湿因子阳性标本可出现抗-HAVIgM假阳性，应引起注意。

抗-HAVIgG：当急性甲型肝炎患者出现症状时，血清中即可检出抗-HAVIgG，初期滴度低，以后逐渐升高，病后3月达高峰，1年内维持较高水平，低水平在血中可维持数十年甚至终身。如双份血清的抗-HAVIgG滴度，恢复期血清有4倍以上增高，可诊断甲型肝炎。常因患者就诊较晚，采不到早期血清，也得不到抗体滴度增长4倍的结果，所以临床上基本不用此诊断方法。抗-HAVIgG主用于检测人群免疫水平流行病学调查。

HAV-RNA利用克隆的HAVcDNA片段制成探针，采用cDNA-RNA分子杂交技术可检测甲型肝炎急性期血清和粪便中的HAV-RNA.自从聚合酶链反应(PCR)应用于临床以来，提供了检测HAV-RNA更敏感的方法。用逆转录PCR(RT-PCR)法，先用逆转录酶将HAV-RNA转为cDNA，然后再进行PCR检测。HAV-RNA阳性，为HAV急性感染的直接证据。

HIV抗体检测方法

免疫印迹试验(WB)、条带免疫试验(LIATEK HIVⅢ)、放射免疫沉淀试验(RIPA)及免疫荧光试验(IFA)。国内常用的确认试验方法是WB。

(一_免疫印迹实验(westernblot，WB)是广泛用于许多传染病诊断的实验方法，就HIV的病原学诊断而言，它是首选的用以确认HIV抗体的确认实验方法，WB的检测结果常常被作为鉴别其他检验方法优劣的“金标准”。

确认试验流程:

有HIV-1/2混合型和单一的HIV-1或HIV-2型。先用HIV-1/2混合型试剂进行检测，如果呈阴性反应，则报告HIV抗体阴性;如果呈阳性反应，则报告HIV-1抗体阳性;如果不满足阳性标准，则判为HIV抗体检测结果不确定。如果出现HIV-2型的特异性指示条带，需用HIV-2型免疫印迹试剂再做HIV-2的抗体确认试验，呈阴性反应，报告HIV-2抗体阴性;呈阳性反应则报告HIV-2抗体血清学阳性,并将样品送国家参比实验室进行核酸序列分析;

WB的敏感性一般不低于初筛实验，但它的特异性很高，这主要是基于HIV不同抗原组分的分离以及浓缩和纯化，能够检测针对不同抗原成分的抗体，因而能够用WB方法鉴别初筛实验的准确性。从WB确认试验结果看出，初筛试验尽管选择质量较好的试剂，如第三代ELISA，仍会有假阳性出现，必须通过确认试验才能得出准确结果。

(二)免疫荧光实验(IFA)

IFA法经济、简便、快速，曾被FDA推荐用于WB不确定样品的诊断。但需要昂贵的荧光显微镜，需要受过良好训练的技术人员、观察和解释结果易受主观因素的影响，结果不宜长期保存，IFA不宜在一般的实验室开展和应用。