恶性疟原虫的诊断

恶性疟原虫的诊断

1.病原学诊断厚、薄血膜染色镜检是目前最常用的方法。

从受检者外周血液中检出疟原虫是确诊的最可靠依据，最好在服药以前取血检查。取外周血制作厚、薄血膜，经姬氏或瑞氏染液染色后镜检查找疟原虫。薄血膜中疟原虫形态完整、典型，容易识别和鉴别虫种，但原虫密度低时，容易漏检。厚血膜由于原虫比较集中，易检获，但染色过程中红细胞溶解，原虫形态有所改变，虫种鉴别较困难。因此，最好一张玻片上同时制作厚、薄两种血膜，如果在厚血膜查到原虫而鉴别有困难时，可再检查薄血膜。恶性疟在发作开始时，间日疟在发作后数小时至10余小时采血能提高检出率。

2.免疫学诊断

(1)循环抗体检测：常用的方法有间接荧光抗体试验、间接血凝试验和酶联免疫吸附试验等。由于抗体在患者治愈后仍能持续一段时间，且广泛存在着个体差异，因此检测抗体主要用于疟疾的流行病学调查、防治效果评估及输血对象的筛选，而在临床上仅作辅助诊断用。

(2)循环抗原检测：利用血清学方法检测疟原虫的循环抗原能更好地说明受检对象是否有活动感染。常用的方法有放射免疫试验、抑制法酶联免疫吸附试验、夹心法酶联免疫吸附试验和快速免疫色谱测试卡等。

3.分子生物学技术PCR和核酸探针

已用于疟疾的诊断，分子生物学检测技术的最突出的优点是对低原虫血症检出率较高。用核酸探针检测恶性疟原虫，其敏感性可达感染红细胞内0.0001%的原虫密度。中国学者采用套式PCR技术扩增间日疟原虫SSUrRNA基因120bp的特定片段，其敏感性达0.1原虫/μl血。

疟疾防治知识

【预防】

1.控制传染源 健全疫情报告，根治疟疾现症患者及带疟原虫者。

2.切断传播途径 主要是消灭按蚊，防止被按蚊叮咬。清除按蚊幼虫孳生场所及使用杀虫药物。个人防护可应用驱避剂或蚊帐等，避免被蚊虫叮咬。

3.提高人群抗病力 疟疾疫苗接种有可能降低本病的发病率和病死率，但由于疟原虫抗原的多样性，给疫苗研制带来较大困难。目前研制的主要是子孢子蛋白和基因疫苗，尚未能供现场应用。

疟疾疫苗、艾滋病疫苗与结核病疫苗已成为全球优先发展的三大疫苗。我国自主研制的“重组疟疾疫苗”已获得国家药品监督局及世界卫生组织的批准，进入临床试验。

化学药物预防是目前较常应用的措施。对高疟区的健康人群及外来人群可酌情选用。常用氯喹，口服0.3g/次，1次/周。在耐氯喹疟疾流行区，可用甲氟喹0.25g/次，1次/周。亦可选用乙胺嘧啶25mg/次，或多西环素0.2g/次，1次/周。

提富乐喹tafenoquine是一种8-氨喹类抗疟药，曾在加纳用安慰剂对G6 PD正常的人和非妊娠妇女做过预防恶性疟的随机、双盲研究，结果显示在用药的13周内，每周口服25mg组的预防效果为32%，50mg组为 84%，100mg组为87%，200mg组为86%，不良反应少而轻，认为是一种较好的恶性疟预防用药。

目前正广泛用于临床病例治疗的青蒿琥酯不宜用作疟疾预防药物，以免疟原虫对它产生耐药性，从而缩短其临床应用周期。

青蒿素起什么作用 青蒿素的功效

青蒿素及其衍生物有良好的抗疟疾作用，它作用于原虫膜系结构，损害核膜、线粒体外膜等结构从而杀灭红细胞内的疟原虫起到抗疟作用。主要用于间日疟、恶性疟的症状控制，以及耐氯喹虫株的治疗，也可用以治疗凶险型恶性疟，如脑型、黄疸型等。亦可用以治疗系统性红斑狼疮与盘状红斑狼疮。

恶性疟原虫的相关新闻

新华网巴黎5月1日电(记者李学梅)法国和美国科学家日前表示，他们发现了恶性疟原虫对于青蒿素类药物的抗药机制，这一发现将有助于科学家研究疟疾的新疗法。

据法国国家科研中心介绍，每年全世界约有100万人死于疟疾，但医学界至今仍未研制出针对这种传染病的有效疫苗。作为疟原虫的一种，恶性疟原虫致病性极强，它主要存在于非洲、南美和亚洲的热带地区，并与80%的人类疟疾相关。十几年来，医学界一直使用青蒿素及其衍生产品对病人进行治疗，它不但治愈率高，而且见效很快。但在去年7月，科学家们发现少数恶性疟原虫对青蒿素类药物表现出抗药性，这为疟疾的防治工作敲响了警钟。

为此，该机构与法国健康与医疗研究所、美国国家健康研究所合作，对恶性疟原虫的抗药机制进行了研究∑学家发现，在青蒿素发挥药效的时候，恶性疟原虫就会进入“休眠状态”，等到药效一过，它又会重新“苏醒”过来，不过只有处于红细胞寄生周期第一阶段的恶性疟原虫才具有这种能力。

研究人员认为，这一发现将帮助科学家更好的了解疟原虫的抗药机制，从而改善疟疾的疗法。相关研究成果已公布在最新一期的美国《抗微生物制剂与化学疗法》月刊上。

疟疾是由疟原虫引起的疾病，多由蚊子传播，在热带及亚热带地区发病较多。疟疾症状包括发热、头痛、呕吐等，严重时可引起死亡。

疟疾的病因与分类

(一)治疗用药建议：

早期的诊断及正确的治疗，是决定疟疾预后最重要关键，由於台湾根除疟疾已经四十年，近年来境外移入的病例每年约只有30例，临床医师若经验不足，常常不能在第一时间诊断出来;另外因为疟疾病况变化迅速，重症疟疾(severe/complicatedmalaria)开始常以非特异性症状来表现，如果不能及早发现给予适当的治疗，常会导致各器官严重并发症甚至死亡。

另外治疗上最棘手的问题是抗药性的问题，以恶性疟来说，传统的药物如chloroquine目前可以说在世界上大部分的流行区都已产生抗药性，甚至在泰国，缅甸，柬埔寨等国的边界还出现对chloroquine，mefloquine，quinine都有抗药性的多重抗药性疟疾(multiple-resistantmalaria)，是治疗上的一大挑战。

90年代以来，越来越被广泛使用的青蒿素类(artemisinin)的药物，被视为是可能解决此一难题的利器。它的安全性高，作用速度快，而且对於不同阶段的疟原虫都有作用[31]，目前WHO的建议是使用这类的药，再搭配另一个不同作用机制的药物(如artesunate+mefloquine;artemether+lumefantrine)，以避免抗药性的产生;根据WHO的统计，到2006年1月为止，青蒿素为主的合并疗法(artemisinin-basedcombinationtherapiesorACTs)已经有56个国家采用为治疗疟疾的第一线用药。

当前治疗疟疾的难题在於一方面必须注意疟原虫的

疟疾的病原体为疟原虫。可感染人类的疟原虫共有4种，即间日疟原虫(Plasmodium vivax)、卵形疟原虫(P.ovale)、三日疟原虫(P.malariae)和恶性疟原虫(P. falciparum)。

一、间日疟和卵圆疟

发作开始为突然寒战发抖，随即反复发热，出汗。为期一周形成间歇性发作的典型模式。头痛或短期不适后，随即寒战发抖，发热持续1～8小时。热退后，病人感到舒适，直到下次寒战前。间日疟新发作趋向于每48小时发一次。

二、恶性疟

发作开始为寒战，体温逐渐上升，然后突然下降。发作可持续20～36小时。病人感到比间日疟重和严重头痛。发作间期为36～72小时，此期常感难受和低热。

三、三日疟

常为突然发作。发作类似间日疟，但为每72小时发一次。

疟疾为单细胞病原体，疟原虫感染红细胞所致。

疟疾的传播为受染雌性按蚊叮咬，输入含疟原虫血，或用注射过疟疾病人的针注射所致。疟原虫有4种——间日疟原虫，卵圆疟原虫，恶性疟原虫和三日疟原虫——能感染人而致疟疾。

在美国和大多数发达国家，由于使用抗疟药和杀虫剂已使疟疾罕见，而在热带，疟疾仍常见。有时，从热带来的访问者或从那里回来的旅游者带来疟疾，可致小暴发。

疟原虫的生活史。当雌性蚊叮咬疟疾病人，摄取含疟原虫血，原虫移至蚊唾液腺，该蚊叮咬他人，原虫沿唾液注入。在人体内，原虫移至肝脏并繁殖，平均2～4周才成熟，然后离肝侵入红细胞，最后致受染的红细胞破裂。

温馨提示：间日疟原虫和卵圆疟原虫可存于肝细胞内，而周期性释放成熟的原虫入血流，致疟疾症状发作。恶性疟原虫和三日疟原虫不存留于肝内。若其感染不治或治疗不当，成熟的恶性疟原虫可在血中存数月，成熟的三日疟原虫可存留血中数年，而致疟疾症状反复发作。

抗药性，另一方面也必须注意抗疟疾药物的毒性。困难在於，目前疟原虫的抗药性系以临床治疗失败作为定义，无法在治疗之前先作药物感受性试验;而且，重症疟疾症状与奎宁，primaquine等抗疟疾药物的毒性狠相似，都会造成恶心，呕吐，溶血性贫血，低血糖，肺水肿及休克，难以从症状来分辨。

因应上述难题，临床医师应考虑疟原虫种别(恶性疟，间日疟，卵形疟，三日疟)，患者感染疟疾的地理区域(非洲，东南亚，新几内亚，或其他地区)，考量患者体质(年龄，心血管疾病，G6PD缺乏症)来选用适当的治疗的药物。

疟疾的诊断

人体四种疟疾在临床表现，病程经过，对药物反应等方面有许多共同性，又各有一定的特殊性，因此，在诊断上应明确患者的疟疾种类。

1.临床诊断要点

①多数病例在发热前有时间长短不一的寒战或畏寒。

②体温在短时间内迅速上升，持续数小时，然后很快下降，继而有不同程度的出汗，每隔2～4h测量体温1次，分析体温曲线，则可发现夜间的体温往往降至正常或在常温以下。

③发作有定时性，发热期与无热期交叠出现，且有一定的规律性。

④病人在发作间歇期除疲劳，无力和略感不适外，一般感觉良好。

⑤发病多见于中午前后和下午，夜间开始发作者较少。

⑥临床症状一次比一次严重，经多次发作后，又渐次减轻，有“自愈”的趋势。

⑦有溶血性贫血的临床表现，其程度与发作次数相符。

⑧脾大，其程度与病程相关，部分病例同时见肝大。

婴幼儿，恶性疟以及新感染病例发作的起初一，二次，临床症状常不典型，此外，一些有较高免疫力的病人，血中带有大量原虫，临床症状却不明显或完全没有，尤须参照体检和实验室检查方能确定诊断。

2.实验室诊断

(1)血中病原体检查：人体四种疟原虫只有恶性疟一种在周围血内仅见环状体和配子体，且在发作期检出机会较多，发作间歇期多数原虫进入内脏毛细血 管，如当时配子体尚未出现，则血检可能暂呈阴性，因此恶性疟在发作期间查血最为适宜;其余三种疟疾的血检不受时间限制，无论在发作期及间歇期均可见到原 虫，临床上酷似疟疾，血检原虫阴性者，应坚持一天查血2次，连续几天，细致地按规定检查厚血膜，其功率高于薄血膜很多倍，凡是疟疾，最终定能在周围血中查 到疟原虫，从患者耳垂或指尖刺取血液涂片，染色，镜检，迄今仍是最可靠的确诊疟疾方法，如发现红内期疟原虫即可确诊。

鉴于镜检法的准确性受到血中原虫密度，制片和染色技术，服药后原虫变形或密度下降以及镜检经验等因素的影响，近年来对传统的血检法有了一些改进，其 一为Becton Dickinson公司QBC法(quantitative buffy coat)，用含有抗凝剂和吖啶橙的毛细管，取病人60µl血，加一个浮器，离心后，疟原虫浓集在红细胞上层和白细胞下层，由于管中央有浮器存在，把上述 两层细胞和疟原虫推向管壁，可以直接在荧光显微镜下检查发荧光的疟原虫，此法有浓缩作用，可提高敏感度，不需要染色，节省了时间，其二是 0.5%～1.0%皂素溶液代替普通水溶血，然后以吉氏液染色后镜检，优点是以皂素处理过的厚血膜底板清晰，无红细胞残骸和血小板干扰，有助于疟原虫检 出。

(2)免疫学检测：

①检测疟原虫抗原;可查出原虫血症者，故对临床诊断为现症病人以及从人群中查传染源，考核疗效均可使用，主要方法有琼脂糖扩散试验，对流免疫电泳，酶联免疫吸附试验，直接荧光或酶免疫染色法等。

②检测疟原虫抗体：可用于流行病学调查，追溯传染源;借助测定流行区人群抗体水平的高低，来推断疟疾的流行趋势;过筛供血者以预防疟疾输血感染，以 及考核抗疟措施的效果等，此外对多次发作又未查明原因者，检测疟疾抗体有助于诊断，检测抗体的方法较常用的有间接荧光抗体试验，间接血凝试验，酶联免疫吸 附试验等。

(3)核酸探针检测：目前国内外已有几种不同的核酸探针用于疟原虫的检测，由于其独特的高特异性，敏感性可高于镜检，认为核酸探针技术非常有希望替 代常规的显微镜检查，且可在短时间内批理处理大量样本，已被认为可以定量及估算疟原虫血症水平，是疟疾流行病学调查及评价抗疟措施效果很有潜力的诊断工 具，目前大量生产核酸探针和大规模现场使用尚存在一些技术问题须解决。

(4)PCR检测：目前公认，在各种疟疾检测方法中，PCR方法的敏感性和特异性是最高的，为进一步提高PCR技术的敏感性和特异性，以及便于在实 际工作中推广，在此基础上，又进行了巢式PCR(nested PCR)，PCR-ELISA等方法的研究，除能够直接检测抗凝血样中的疟原虫外，PCR检测滤纸干血滴上的疟原虫技术也已成熟，从而便于以PCR技术监 测边远地区的疟疾，由于它对实验技术和条件的要求较高，从而限制了其在现场的应用，就目前多数疟区的条件，现场采血后，尚要回到具有较好条件的实验室做进 一步的分析处理。

(5)Dipstick方法：目前，世界卫生组织推荐应用Dipstick方法，其原理是利用恶性疟原虫能够合成，分泌一种稳定的水溶性抗原-富组 蛋白Ⅱ(histidine rich proteinⅡ，HRPⅡ)，以其制备的单克隆抗体滴于免疫层析条上，经过吸附，洗涤与显色，检测血中富组蛋白Ⅱ的存在，据国外比较Dip-stick 及其他几种方法的报道，Dipstick方法诊断疟疾的敏感性(84.2%～93.9%)和特异性(81.1%～99.5%)均较高;且具有操作简便，快 速稳定，易学的特点，适用于镜检或实验室技术质量难以保证，及待确定疟疾的流行范围，疟疾呈低度传播，需避免药物滥用以减少抗性发展的地区，必须指出的 是，应用Dipstick方法也有一定的局限性，用此法难以检出尚处于潜伏期或血中仅含有成熟配子体的恶性疟原虫。

鉴别诊断

临床表现典型的疟疾，诊断不难，对于占1/3以上的所谓非典型病例，须与以发热，脾大和肝大为特点的其他疾病相鉴别，以免贻误治疗，扩散疟疾，或忽视了与疟疾并存的其他疾病。

1.急性血吸虫病 有血吸虫病流行区的疫水接触史和尾蚴皮炎史，常见腹泻和黏血便等消化系统症状和干咳等，与疟疾不同的是肝大者占的90%以上，以左叶较显著，白细胞数增加，嗜酸粒细胞增多，尾蚴膜反应，环卵沉淀试验或大便孵化阳性。

2.丝虫病 多数有既往发作史，白细胞和嗜酸粒细胞增多，无贫血和脾大，血微比蚴多为阳性。

3.黑热病 有黑热病流行区居住史，发热一般不规则，后期可发展为全血细胞减少，有鼻出血或齿龈出血等症，肝脾大，骨髓穿刺可查到利杜体。

4.阿米巴肝脓肿 肝脏明显肿大和疼痛，无脾大，热型不规则，白细胞显著增多，以中性粒细胞为主，超声波及X线检查可发现脓肿。

5.伤寒 发热呈稽留热，有玫瑰疹，腹胀等胃肠道症状和其他全身中毒症状等，血，骨髓，大便等细菌培养和伤寒血清凝集反应阳性。

6.败血症 体温不规则，白细胞及中性粒细胞显著增多，一般可发现感染原因，血或骨髓细菌培养阳性。

7.布氏杆菌病 发热呈周期性，一般症状不重，以后可见一系列神经症状，可进行皮内和血清学试验。

8.钩端螺旋体病 体温多呈持续热或弛张热，有上眼结膜充血，腓肠肌痛，淋巴结肿痛，皮肤黏膜出血，肝功能损害和肺部症状等，可进行血清免疫学试验和检查钩端螺旋体确诊，青霉素有效。

9.急性肾盂肾炎 发热不规则，有腰酸，尿频，尿急及尿痛等，尿检查见红，白细胞及蛋白，细菌培养阳性。

10.脑型疟疾 本病发生易与流行性乙型脑炎，中毒性痢疾，中暑相混淆，通常要仔细反复查找疟原虫，毒痢还应做粪常规，培养，一时弄不清可先用抗疟药治疗以等待结果。

11.其它如粟粒性结核，胆道感染引起的长热程发热也要注意鉴别。

蚊子会传播哪些疾病 疟疾

由按蚊传播，是疟原虫传播引起怕传染病，夏季两季多见，常年可发病，国内多见于长江流域及其以南地区，可遍布全国，北方地区发病较少。临床表现为：间歇性寒战、高热，出汗，脾肿大，贫血。临床可分间日疟疾、三日疟疾、恶性疟疾三型。其中恶性疟疾可侵犯内脏，预后不良。

青蒿素从什么植物中提取的 青蒿素的作用于用途

青蒿素为一高效、速效抗疟药。作用于疟原虫红细胞内期，适用于间日疟及恶性疟，特别是抢救脑型疟均有良效。其退热时间及疟原虫转阴时间都较氯喹短。对氯喹有抗药性的疟原虫，使用该品亦有效。